Köszönjük, hogy meglátogatta a Nature.com oldalt.Az Ön által használt böngészőverzió korlátozott CSS-támogatással rendelkezik.A legjobb élmény érdekében javasoljuk, hogy használjon frissített böngészőt (vagy tiltsa le a kompatibilitási módot az Internet Explorerben).Addig is a folyamatos támogatás érdekében a webhelyet stílusok és JavaScript nélkül jelenítjük meg.
A poszttraumás stressz zavart (PTSD) a traumával kapcsolatos jelzésekre adott félelemreakciók semlegesítési képességének károsodása jellemzi.Humán és állatkísérletek rámutatnak arra, hogy a frontális kéreg egyes területei, mint kulcsfontosságú mediátorok, a félelem elnyomásának sikerét meghatározó közvetítők bevonása eltérő, de nem egyértelmű az e területek eltérő érintettségét meghatározó idegi áramkörök kölcsönhatása.Annak érdekében, hogy jobban megértsük, hogy az extinkciós felidézés egyéni különbségei hogyan tükröződnek a neuronális kör aktivitásában, a patkány szublimbicus kéregből (IL) származó projekciókat retrográd nyomjelzőkkel jelöltük meg, és összehasonlítottuk az IL projekciós neuronokon belüli és kívüli neuronális projekciókat.Ezeket az adatokat elemeztük, és aszerint csoportosítottuk őket, hogy a patkányok elhalványuló memóriájának megőrzési foka szerint.Azt találtuk, hogy az IL-vetítő sejtekben a hátsó parathalamusz neuronjai fokozott aktivitást mutattak patkányokban, ami jó kihalási visszaidézést mutatott.Az IL-vetítő sejtek mellett fokozott Fos aktivitást figyeltek meg a patkány claustrum és a ventralis hippocampus kiválasztott területein, jó felbontással.Eredményeink azt mutatják, hogy az extinkciós felidézés különbségei az IL-projekciókon belüli és kívüli idegi aktivitás specifikus mintázataihoz kapcsolódnak.
A félelem kondicionálása akkor következik be, amikor egy semleges inger egy averzív feltétel nélküli ingerhez (UCS) társul, így az eredetileg semleges inger, ma a feltételes inger (CS), feltételes félelemreakciót (CR) vált ki az UCS hiányában.A kondicionált félelem megfordítását a CR CS-re való csökkenése okozta a CS ismételt bemutatása miatt UCS1 hiányában.Korábbi kutatások kimutatták, hogy a poszttraumás stressz-zavar (PTSD) azzal jár, hogy képtelen emlékezni a kondicionált félelemreakciók kihalására2.A kognitív viselkedésterápia sarokköve a poszttraumás stressz-zavar kezelésében a tanult félelemreakciók kioltásán alapuló expozíciós terápia3,4.Ezért a rágcsálók kihalástól való félelmében és a mögöttes idegrendszeri mechanizmusokban mutatkozó egyéni különbségek tanulmányozása segíthet a traumákra adott emberi reakciók és a poszttraumás stressz-zavar kezelésének különbségeinek tisztázásában.Annak ellenére, hogy előrelépés történt a sikeres és a sikertelen kihalási emlékeket megkülönböztető idegi mechanizmusok azonosításában, még sok a felfedeznivaló.
A rágcsálómodellek azért hasznosak ebben a munkában, mert jelentős egyéni különbségek vannak a rágcsálók kipusztulásának emlékezésében7,8,9,10.A félelem kihalásának idegi mechanizmusait populációs szinten vizsgáló korábbi munkák kimutatták, hogy az infralibikus kéreg (IL) aktiválása szükséges a kihalás felidézéséhez (11., 12., 13. hivatkozás, de lásd 14.), és egyes tanulmányok a a rágcsálók aktivitása az IL-ben, amely gyengén emlékezik a kihalásról a rágcsálókhoz képest, amelyektől nagyon félnek.Nem tisztázott azonban, hogy milyen mechanizmusok révén az IL-ek eltérő módon vesznek részt a félelem megszüntetésében a rágcsálókban, mint a gyengébb kihalást mutatókkal szemben.
Az egyik lehetőség az, hogy az egyének közötti félelemkioltási memória különbségei a specifikus afferens IL-ek eltérő aktiválásának az eredménye.Anatómiai vizsgálatok18 kimutatták, hogy az agy különböző kérgi és szubkortikális területei sűrű vetületeket küldenek az IL-nek, ami viszont efferens vetületeket küld az agy számos területére.Populációs szintű tanulmányok kimutatták, hogy az IL-projekciók az amygdalára fontosak a félelem kihalásához20, 21,22, és a bazolaterális amygdalából (BLA) származó IL-bemenet szintén összefügg az extinkciós tanulással.Kevesebb kutatás folyik az IL-központú áramkörök szerepéről a kihalás felidézésében, bár a legújabb munkák azt sugallják, hogy mind a ventrális, mind a dorsalis hippocampus részt vesz az IL előrejelzésében.Az IL efferens vetületei a talamusz rekombináló magjára, úgy tűnik, szintén részt vesznek a félelem kihalásának emlékében.
Ezek a korábbi tanulmányok kezdenek képet festeni a kihalás felidézésében részt vevő idegi áramkörök kölcsönhatásáról, de nagyon kevés adat áll rendelkezésre arról, hogy az IL-központú idegi áramkörökben való aktivitás befolyásolja-e a kihalás felidézésében mutatkozó egyéni különbségeket.Itt arra törekedtünk, hogy meghatározzuk, hogy az egyének közötti félelemkioltási memória különbségei összefüggésben állnak-e az IL-bemenet aktiválásának változásával bizonyos agyi régiókban.Különösen az IL afferens sejtek aktivációját értékeltük a thalamus paraventricularis magjában (PVT), a kulcscsontban (CLA), a BLA-ban és a ventrális hippocampusban (vHPC).Ezeket az agyi régiókat egyrészt azért választottuk ki, mert sűrű vetületeket küldenek az IL-nek, másrészt azért, mert okkal gyanítható, hogy részt vehetnek a félelem kihalásának kifejezésében18.Például egy közelmúltbeli tanulmány kimutatta, hogy a PVT, egy olyan régió, amelyről ismert, hogy részt vesz a félelemszerzésben és a szaporodásban, szükséges a kihalásos szaporodáshoz.Ezenkívül korábbi vizsgálatok megnövekedett bazális amygdala és vHPC aktivitást mutattak kihalási memóriát kifejező patkányokban.Végül a clausrum elemzése inkább feltáró jellegű, mivel a korábbi munkák egyike sem értékelte a kihalásban játszott szerepét.A legújabb munkák azonban azt sugallják, hogy szerepet játszik a félelem kontextuális kondicionálásában29.
Vírusos GFP-vel konjugált retrográd nyomjelzőket injektáltunk patkányok IL-ébe a viselkedési tesztelés előtt, és az IL-afferensek Fos-aktivitását mértük az extinkciós visszajátszás, a félelem felidézése és a viselkedési tesztnek nem alávetett patkányokban.Eredményeink azt mutatják, hogy a hátsó paraventricularis thalamustól az IL-ig terjedő vetületek fokozott aktivitást mutatnak azokban a patkányokban, amelyek sikeresen visszaemlékeznek a kihalásra.Az IL előrejelzések mellett a kulcscsont és a ventrális hippocampus bizonyos területein az idegi aktivitás megnövekedett azokban a patkányokban, amelyek jól visszafejlődnek.Eredményeink azt mutatják, hogy az IL-re vetített belső és külső neurális aktivitás mintázata a félelem kihalási memóriájában fennálló egyéni különbségekkel függ össze.
A Charles River Laboratories-tól (Raleigh, NC) 54 felnőtt hím Sprague-Dawley patkányt (300-325 g érkezéskor) használtunk alanyként.A patkányokat párokban helyeztük el, szabad hozzáféréssel élelemhez és vízhez, 12 órás világos/sötét ciklusban (a világítás reggel 7-kor felkapcsol).Két patkánycsoportot (n = 28 és n = 26) használtunk ezekhez a kísérletekhez.A halálozás, a műtéti hiba, a GFP expresszió hiánya a célhelyen, a rossz szövetminőség és a viselkedési problémák kizárása után (magyarázat a Módszerekben), a kihalási visszahívási csoportba 21 patkány, a félelem-visszahívási csoportba pedig 7 patkány, házi ketrecek tartoztak.a csoport 7 patkányból állt (35 patkány szerepelt a végső elemzésben).Minden eljárást jóváhagyott a Stony Brook Egyetem Intézményi Állatgondozói és Felhasználási Bizottsága, és összhangban voltak az ARRIVE útmutatóval (https://arriveguidelines.org) és a NIH Laboratóriumi állatok gondozására és felhasználására vonatkozó iránymutatásaival.
A patkányokat két nappal a műtét előtt kezelték.A patkányokat ketaminnal (87 mg/kg) és xilazinnal (10 mg/kg) érzéstelenítettük, sztereotaxiás készülékbe (Stoelting, Woodale, IL) helyeztük, és egyoldalú AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) injekciót kaptak IL-be.(egyensúlyozza a bal és jobb injekciót).Az injekció beadásához egy 22-es kanült leeresztettünk a helyére (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Helyezzen be egy 28G-s belső kanült (a PE 20 csövön keresztül egy infúziós pumpához csatlakozik) a vezetőkanülbe, hogy 0,6 µl vírust bocsásson ki percenként 0,15 µl sebességgel, és hagyja a helyén 5 percig, miután az infúzió sértetlen..A varrást követően a patkányok meloxicamot (1 mg/kg) injekcióztak, és amint mozogni tudtak, visszahelyezték ketrecükbe.A patkányokat körülbelül 7 hétig ketrecükben tartottuk, hogy lehetővé tegyék a vírus felépülését és a retrográd transzportot.Három patkány elpusztult altatásban, így 51 patkány (94%) gyógyult fel sikeresen a műtétből.
Minden eljárást 32 cm × 25 cm × 21 cm-es kondicionáló kamrákban (Clever Systems Inc., Reston, VA) végeztünk, amelyek 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm-es hangelnyelő szigetelő dobozokban (Clever Sys. . Inc.) voltak elhelyezve.).Az extinction tanulási és kioltási visszahívási munkamenetek során a kontextus megváltozott, hogy eltérjen az eredeti feltételes kontextustól.Az A feltétel (félelemgenerálás) 28 voltos, háztartási izzólámpákat tartalmazott (Chicago Micro Lighting, Egyesült Királyság), míg a B feltétel (kioltási tréning, kioltási felidézési teszt és félelemfelidézési teszt) infravörös LED-lámpákat (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) tartalmazott. ., Kína;U48R).Ezenkívül, míg a Context A rezgéscsillapító rácspadlóval rendelkezik, rozsdamentes acél és plexi falakkal, addig a Context B festett fémbetéteket tartalmaz a padlón és a falakon.A Context B formát úgy is módosították, hogy egy 33,5 cm x 21,3 cm-es ívelt fémbetétet helyeztek egy szabványos kondicionáló kamrába.Ezenkívül A kontextusban a kamrákat 5%-os ecetsavval, míg a B kontextusban a kamrákat 5%-os ammónium-hidroxiddal töröltük át.Végül a B kontextusban a patkányokat vödrökben vitték be a vizsgálóhelyiségbe, ahelyett, hogy ketrecekben gurították volna őket szekereken.A viselkedési szekciókat a felső kamerával rögzítettük, és az egyes kamerák videojelét olyan szoftverbe (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) tápláltuk be, amely a pixelváltozások alapján értékelte a fading viselkedést.A paramétereket úgy választottuk meg, hogy a számítógép által becsült fading viselkedése szorosan illeszkedjen a képzett megfigyelők manuálisan becsült viselkedéséhez.Egy érték, amely a 30 másodperces intervallumban felgöngyölített fagyási idő százalékos arányát jelzi.
Minden viselkedési program a világos/sötét ciklus világos szakaszában kerül végrehajtásra.A patkányokat 5 nappal a viselkedési eljárások megkezdése előtt kezeltük, és a kezelés utolsó három napjára a viselkedési szobába szállították.A viselkedési tesztelés első napján egy csoport extinkciós felidéző ​​patkányt félelem kondicionált reflexbe helyeztek, majd az A kontextusba helyezték őket, 6 perces stimulálatlan akklimatizációs periódust kaptak, majd mindkét kombinációt 4 kHz, 76 dB, 30 s. .hang és teljes befejezés, 1,0 mA, rúgás 1 s (2 perc ITI).Az összes viselkedési tréning során a patkányokat visszahelyeztük a ketrecekbe 2 perccel az inger utolsó bemutatása után.A következő napon az extinkciós-visszahívási csoport patkányait a B kontextusszobába helyeztük, és 6 perces szoktatási periódus után 20 hangbemutatót (2 perc ITI) végeztek extinkciós tréningként.Másnap az extinkciós szaporodási csoportba tartozó patkányokat 4 tónusnak tették ki a B kontextusban 6 perces akklimatizációs periódus után extinkciós tesztként.Az extinkciós memória csoportba tartozó patkányokat 60 perccel a viselkedési ülés után perfundáltuk.A félelememlékeket felidéző ​​kontrollpatkányok egy csoportját ugyanezen eljárásnak vetették alá a félelemhez kötött válasz első napján az A kontextusban. Negyvennyolc órával később a patkányokat a B kontextusszobába helyezték, és 4 hangbemutatónak vetették alá (2- perc ITI) visszahívási tesztként.félelem egy 6 perces akklimatizációs időszak után.A patkányokat a viselkedési vizsgálat után 60 perccel perfundáltuk.A házi kontrollpatkányok egy csoportja a kísérlet alatt az otthoni ketrecükben maradt, és ugyanazon a napon perfundáltuk őket, mint a kísérleti patkányokat.A két patkánycsoport mindegyikét két sorozatra osztottuk, és az állatok számát az egyes csoportokban kiegyenlítettük a sorozatok között.A félelememlékek csoportjából egy patkányt kizártak az elemzésből, mert nem mutatta a félelem kondicionálásának jeleit (a félelememlékezések tesztje során az esetek kevesebb mint 15%-ában fagyott meg).A viselkedési idővonal diagramját lásd a 2A ábrán.
A patkányokat túladagoltuk Fatal Plus oldattal (100 mg/kg), majd jéghideg 10%-os PBS-sel, majd 10%-os pufferolt formalinnal perfundáltuk.Az agyat eltávolítottuk, és 30%-os formalinos szacharózoldatban tároltuk 4 °C-on körülbelül 1 hétig.Ezután az agyat lefagyasztottuk, és egy 40 µm vastag kriosztátba vágtuk.A metszeteket egymás után 10%-os PBS-ben tároltuk 4 °C-on.Ezután immunfluoreszcenciát végeztünk a kérdéses agyi régiót tartalmazó, szabadon lebegő metszeteken.A metszeteket háromszor mostuk 10%-os PBS-ben 5 percig.A metszeteket ezután normál kecskeszérum 5%-os blokkoló oldatában inkubáltuk 2 órán át szobahőmérsékleten, majd még háromszor mostuk 5 percig 10%-os PBS-ben.A metszeteket ezután egy éjszakán át 4 °C-on 10% PBS-ben 1% BSA-val hígított primer antitestekben (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) inkubáltuk.Másnap a metszeteket 10%-os PBS-ben mostuk 30 percig 4°C-on, majd háromszor 5 percig 10%-os PBS-ben, és egy másodlagos antitesttel (Alexa Fluor 594 kecske antinyúl, vörös konjugátum, 1:500) inkubáltuk. ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) szobahőmérsékleten 2 órán át.3 további 5 perces 10%-os PBS-es mosás után a metszeteket üveglemezekre helyeztük, és Fluoromount-G-vel (Invitrogen) lezártuk.Lásd az immunfestés reprezentatív képeit a 3G. ábrán.
A Zeiss mikroszkóphoz csatlakoztatott Infinity3 digitális fényképezőgépet (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) és fénymotort (Lumencor, Beaverton, OR) használó fluoreszcens mikroszkóp segítségével az agy minden egyes területéről vettek képeket, beleértve a IL immunfluoreszcencia nélkül.az injekció beadásának helyének megfelelő elhelyezésének ellenőrzésére.A sejtszámláláshoz használt képeket 20-szoros nagyítással kaptuk.Minden szövetmetszethez készítsen egy képet egy szűrővel, amely lehetővé teszi a GFP megjelenítését, és egy képet olyan szűrővel, amely lehetővé teszi a másodlagos antitestben lévő Alexa Fluor vörös konjugátum megjelenítését, és a képalkotáshoz képalkotó szoftvert (Infinity Analyze, 3. verzió) használtak. átfedés.Az agy összes területéről azonos expozíciós idővel és erősítési beállításokkal készítse el az összes képet.Hat patkányt kizártunk az elemzésből, mivel a vírus fő átvitele az IL-n kívül történt (88%-os találati arány).Nyolc további patkányt kizártunk, mert annak ellenére, hogy a vírus megtámadta az IL-t, nem mutattak elegendő GFP expressziót az összes érintett agyi régióban.Ezenkívül egy patkányt kizártak a rossz szövetminőség miatt.
Állítsa be a fényerőt és a kontrasztot, hogy csökkentse a háttérzajt a J képen (NIH), ugyanazt az eljárást alkalmazva minden egyes képhez.Az összes retrográd jelzett sejtek, az összes Fos-jelölt sejtek és az összes kétszeresen jelölt sejtek sejtszámát a kísérletvezető manuálisan végezte el, aki nem azonosította az állatokat, az Image J citométer beépülő modul segítségével.A sejtszámot sejt/mm2 értékre normalizáltuk.A Fos-expresszió elemzéséhez IL-vetítő sejtekben a kétszeresen jelölt sejtek számát a retrográd jelölt sejtek teljes számára normalizáltuk.Az mBLA, mvHPC és pvHPC analízishez a több 20x képből származó sejtszámot összeadtuk és sejt/mm2 értékre normalizáltuk.Az agy többi részének elemzéséhez egy 20-szoros képet vagy egy 20-szoros kép egy részét elemeztük, és sejt/mm2-re normalizáltuk.A vHPC elemzés CA1, CA2 és szubdomináns vHPC régiókat tartalmazott.Az 1. ábra a sík elülső-hátsó határát leíró képekkel elemzett agyi régiókat mutatja be.
Az agy érdekes régióinak rövidítései és elhelyezkedése.A kéziratban megadott rövidítések és agyi régiók elhelyezkedésének magyarázata.Nyilvános agytérkép Swansontól (2004) Brain Map: Structure of the Rat Brain, 3. kiadás, Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) licenc alatt. ./), letölthető a https://larrywswanson.com címről.
A kimerevítési idő százalékos átlaga egy 30 másodperces hanglejátszási periódusra vonatkozik, a köztes intervallumok nélkül.Az extinkciós visszahívási arányokat úgy számítottuk ki, hogy az elhalványulási idő százalékos arányát a kioltás visszahívása során az elhalványulás százalékában fejeztük ki az első 4 kioltási gyakorlati kísérlet során (elhalványulás négy kioltási visszahívási hang alatt/elhalványulás az első négy kioltási képzési hang alatt*100).Az alacsony pontszámok a jó fade memóriát, a magas pontszámok pedig a gyenge fade memóriát jelzik.A patkányokat az extinkciós visszahívási pontszám szerint rendezték, a kihalási visszahívási pontszám felső harmadában lévő patkányokat a „rossz kihalási patkányok” kategóriába, a kihalási visszahívási pontszám utolsó kétharmadába tartozó patkányokat pedig „jó” kategóriába sorolták.Elhalványuló memória patkányok.
Nem paraméteres teszteket használnak, mivel az adatok gyakran sértik a normál eloszlásra és/vagy a variancia homogenitására vonatkozó feltételezéseket.Spearman rangkorrelációját használták annak meghatározására, hogy van-e szignifikáns összefüggés az extinkciós visszahívási pontszámok és a Fos-markerek, valamint a kettős markerek között az agyi érdeklődésre számot tartó területeken az összes, az extinkciós visszahívási tesztnek alávetett patkányban.A Mann-Whitney U-tesztet használták annak meghatározására, hogy van-e különbség két független csoport között.A Kruskal-Wallis tesztet annak meghatározására használják, hogy 2 vagy több csoport különbözik-e egymástól, a Dunn többszörös összehasonlító tesztet pedig akkor, ha a Kruskal-Wallis statisztika szignifikáns.Az extinkciós tanulás során bekövetkező fakulást ismételt mérésű varianciaanalízissel értékeltük, amelyben a csoport volt az alanyok közötti faktor, és a teszt mint az alanyon belüli faktor. Az eredményeket akkor tekintettük szignifikánsnak, ha p < 0,05 minden statisztikai teszt esetében. Az eredményeket akkor tekintettük szignifikánsnak, ha p < 0,05 minden statisztikai teszt esetében. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Az eredményeket minden statisztikai teszt esetében szignifikánsnak tekintettük p < 0,05 értéknél.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Az eredményeket minden statisztikai teszt esetében szignifikánsnak tekintettük p < 0,05 értéknél.
A 2. ábra a kísérleti idővonalat (2A. ábra) és az összes kipusztulásnak kitett patkány gyakorisági eloszlását mutatja (2B. ábra). A jó és a gyenge extinkciós csoportba tartozó patkányok szignifikánsan különböztek ezekben a számított extinkciós visszahívási pontszámokban (U = 0, p < 0,001) (2C. ábra). A jó és a gyenge extinkciós csoportba tartozó patkányok szignifikánsan különböztek ezekben a számított extinkciós visszahívási pontszámokban (U = 0, p < 0,001) (2C. ábra). Крысы в ​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались по этим по этим рассчитанным рассчитанным рассчитанным рассчитанным рассчитанным по этим рассчитанным по этим. A jó és a gyenge extinkciós csoportba tartozó patkányok szignifikánsan különböztek ezekben a számított extinkciós visszahívási arányokban (U=0, p<0,001) (2C. ábra).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差 = ， 0， 0 0 U = 0, p < 0,001 (图2C， (В этих рассчитанных показателях припоминания угашения крысы вигруппах с илсра0 с хорочим и плохим угах). Ezekben a számított extinkciós visszahívási arányokban a jó és a gyenge extinkciós csoport patkányai szignifikánsan különböztek egymástól (U = 0, p < 0,001) (2C. ábra).Nem volt szignifikáns különbség a fagyás idejében a jó extinkcióval, gyenge extinkcióval és félelemfelidézéssel rendelkező csoportok között a félelemkondicionált reflex szekció bázisidőszakában (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (2D ábra).Ráadásul a félelemhez kötött reflex első hangjának bemutatása során nem volt szignifikáns különbség a fagyás idejében a jó extinkciós, gyenge extinkciós és félelemfelidéző ​​csoportok között (X2(2) = 1,107, p = 0,575), mivel valamint félelem közben a második hangok alatt.A kondicionálás során szignifikáns különbség volt a fagyás idejében a jó extinkciós, gyenge extinkciós és félelmet felidéző ​​csoportok között (X2(2) = 2,214, p = 0,331) (2D ábra).Szintén nem volt szignifikáns különbség az elhalványulási időben a jó és a gyenge extinkciós csoportok között az alapvonali kioltási képzési periódus alatt (U = 45,00, p = 0,799) (2D. ábra). Ezután a próbablokk (blokkonként 5 hang) szignifikáns fő hatása volt az extinkciós edzés során fagyással töltött időre (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), ami azt jelzi, hogy az extinkciós tanulás megtörtént (2D. ábra). ). Ezután a próbablokk (blokkonként 5 hang) szignifikáns fő hatása volt az extinkciós edzés során fagyással töltött időre (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), ami azt jelzi, hogy az extinkciós tanulás megtörtént (2D. ábra). ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 тонов на блок) на время, затрачиваемое на замирание во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( рис. 2D). Ezután a próbablokk (blokkonként 5 hang) szignifikáns fő hatása volt az extinkciós tréning során a fagyás idejére (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), ami azt jelzi, hogy az extinkciós tanulás zajlik. 2D). ).接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， ， （每 块 块 5 音） 对 时间 有 有 显着 主 效应 （（f （2,884 ，54.80） = 8,331 ¢ p <0,001） ， 表明 了 学习 学习 （图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图）））））））））））））））））））））））））））））） .接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， ， （每 块 块 5 音） 对 时间 有 有 显着 主 效应 （（f （2,884 ，54.80） = 8,331 ¢ p <0,001） ， 表明 了 学习 学习 （图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图）））））））））））））））））））））））））））））） . Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис 2D). Ezután az extinkciós tanulás során a próbablokkok (blokkonként 5 hang) jelentős fő hatást gyakoroltak az elhalványulási időre (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), ami azt jelzi, hogy az extinkciós tanulás zajlik (.2D ábra). .Az extinkciós csoport (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) azonban nem gyakorolt ​​szignifikáns hatást az elhalványulási időre a teljes kioltási képzési időszak alatt, és nem volt kölcsönhatás a próbablokk és az extinkciós csoport között (F(4) , 19)) .76) = 1,890, p = 0,121) (2D. ábra). A tesztelés során szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, rossz extinkciós és félelemi felidéző ​​csoportok között az alapidőszakban fagyással töltött idő tekintetében (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), így a félelemfelidézés csoport szignifikánsan lefagyott. több, mint a jó extinkciós csoport (Mean Rank Diff. = 10,57, p = 0,017), de nem a rossz extinkciós csoport (Mean Rank Diff. = - 3,714, p > 0,999) (2D ábra). A tesztelés során szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, rossz extinkciós és félelemi felidéző ​​csoportok között az alapidőszakban fagyással töltött idő tekintetében (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), így a félelemfelidézés csoport szignifikánsan lefagyott. több, mint a jó extinkciós csoport (Mean Rank Diff. = 10,57, p = 0,017), de nem a rossz extinkciós csoport (Mean Rank Diff. = - 3,714, p > 0,999) (2D ábra).A tesztelés során szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, a rossz kihalásos és a félelemfelidéző ​​csoportok között az alapidőszakban fagyással töltött idő tekintetében (X2(2) = 8,569, p = 0,014), így a félelemfelidézés csoport lefagyott. szignifikánsan .больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в группе плохого вымирания (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). nagyobb, mint a jó extinkciós csoportban (átlagos rangkülönbség = 10,57, p = 0,017), de nem a rossz extinkciós csoportban (átlagos rangkülönbség = -3,714, p > 0,999) (2D ábra).在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 和 恐惧 回忆组 在 冻结 时间 方面 存在 显着 差异 （（x2 (2) = 8,569 p = 0,014） ， 因此 回忆组 冻结 显着 超过 良好 灭绝 灭绝 组 组 组 组 组 组） ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 恐惧 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 （（（（（（（（（（（（显着 方面 时间 时间 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3,714，p > 0,2，p> 0,9＀D在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 方面 存在 显着 差异 （（（x2 (2) = 8,569 p = 0,014） ， 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组 组 组 组） ， 恐惧 恐惧 回忆组 冻结 显着 显着 显着 显着 冻结 冻结 回忆组 回忆组 回忆组 恐惧 恐惧 恐惧 恐惧 恐惧 恐惧 恐惧 恐惧 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组组 组 组（平均秩差 = 10,57, p = 0,017 В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угашением, группой с плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на исходном уровне (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не группа, = 7,22 p,0,9,0,9,0,9,0,9,9 A tesztelési időszakban szignifikáns különbség volt a jó extinkciós csoport, a rossz extinkciós csoport és a félelemfelidéző ​​csoport között a kiindulási fagyasztási idő tekintetében (X2(2) = 8,569, p = 0,014), tehát a félelem-felidézés. csoport szignifikánsan gyakrabban fagy le, mint a jó extinkciójú csoport (átlagos rangkülönbség = 10,57, p = 0,017), de nem a gyenge extinkciójú csoport (átlagos rangkülönbség = -3,714, p > 0,999) (2D ábra).A jó extinkciós csoportban, a rossz extinkciós csoportban és a félelemfelidéző ​​csoportban is szignifikánsan eltérő volt az elhalványulási idő a tesztmenet hangbemutatója során (X2(2) = 14,93, p = 0,001), így a jó extinkciós csoportban szignifikánsan kevesebb volt idő.fagyási idő, mint a gyenge extinkciós csoportban (átlagos rangkülönbség = 9,286, p = 0,044) és a félelemmemória csoportban (átlagos rangkülönbség = 13,86, p = 0,001) (2D. ábra).
Egyéni különbségek a kihalás emlékében.(A) A sebészeti és viselkedési eljárások vázlata.(B) Frekvenciaeloszlás, amely az eltűnő memória pontszámok egyéni különbségeit mutatja.(C) Bizonyíték arra, hogy a kiszámított extinkciós visszahívási pontszámok alapján tervezett csoportok két különböző fenotípust képviselnek.(D) Az idő átlagos százalékos aránya, amikor a patkányok lefagynak rossz kihalás, jó kihalás és félelemfelidézés miatt a kondicionált félelemreflexes munkamenet 30 másodperces sejtjeiben, 20, 30 másodperces hangokban, és 5 blokkra omlottak össze a kioltási tanulás során (4 hang) .mindegyik), és négy hangon az elhalványulás és a félelem emlékeinek szekcióiban.A hibasávok az átlag szórását jelentik. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Egy retrográd indikátort injektáltunk az IL-be (3A. ábra), és meghatároztuk a GFP+ sejtek számát a vizsgált régió elülső-hátulsó tengelye mentén (3B-F. ábra).Szignifikáns különbség volt a GFP+ sejtek számában az elülső, középső és hátsó PVT között (X2(2) = 8,200, p = 0,017), így az mPVT szignifikánsan több GFP+ sejtet mutatott, mint az aPVT (átlagos rang) Diff.= 18,37, p = 0,035) és pPVT (átlagos rangkülönbség = 17,71, p = 0,045) (3C. ábra).Bár több állat nem mutatott ki GFP+ sejtet a pCLA-ban, és ezért nem tudta feltérképezni az aktivitást ebben a régióban, nem volt szignifikáns különbség az elülső, középső és hátsó CLA között (X2(2) = 5,596, p = 0,061).GFP+ sejtek száma (3D. ábra).Ezután, mivel néhány GFP+ sejtet találtak aBLA-ban vagy avHPC-ben több patkányban, ezeknek a területeknek csak a közepét és a hátát elemeztük.A középső és a hátsó BLA (U=393, p=0,009) szignifikánsan különbözött a GFP+ sejtek számában, így a pBLA több IL-projekciót mutatott, mint az mBLA (3E. ábra).Hasonlóképpen szignifikáns különbség volt a középső és hátsó vHPC-k között, így a pvHPC-k több IL-projekciót mutattak, mint az mvHPC-k (U = 403,5, p = 0,014) (3F ábra).A 3G. ábra egy példakép, amely a Fos-t, az aavRG-GFP-t és a kettős jelölésű sejteket mutatja.
Számszerűsítse az IL-afferenseket a teljes érdeklődésre számot tartó agyi régióban.(A) Az aavRG-CAG-GFP eloszlásának sematikus ábrázolása a teljes patkány IL-ben.(B) A retrográd markerek reprezentatív képei a vizsgált agyterület különböző anteroposterior helyein.A retrográd jelölés számszerűsítése az anteroposterior tengely (C) paraventricularis thalamus, (D) kulcscsont, (E) basolaterális mandula és (F) ventrális hippocampus mentén.(G) Reprezentatív képek, amelyek retrográd aavRG jelölést, Fos jelölést, valamint kettős aavRG és Fos jelölést mutatnak az aPVT-ben.A hibasávok az átlag szórását jelentik. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Skála 100 µm.Az A panelen található nyilvános agytérkép a Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3. kiadásból származik, amely a Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 nemzetközi licence alapján engedélyezett (https://creativecommons.org/licenses/by-nc). )./4.0/) letölthető a https://larrywswanson.com címről.
A globális és IL-projekció-specifikus Fos aktivitást aPVT-ben, mPVT-ben és pPVT-ben elemeztük minden patkányban.Nem volt szignifikáns különbség a jó extinkció, a rossz extinkció, a félelem felidézése és az otthoni sejtcsoportok között a Fos expressziójában aPVT-ben (X2(3) = 3,888, p = 0,274) (4A ábra), és nem volt szignifikáns korreláció a Fos között. az aPVT-ben az expresszió és az extinkciós visszahívás között (rs = 0,092, p = 0,691) (4B. ábra), vagy az aPVT IL-afferensekben a Fos expressziója és az extinkciós visszahívás között (rs = 0,143, p = 0,537) (4D. ábra).Az aPVT IL-afferensekben azonban a Fos expressziója szignifikánsan különbözött a jó extinkciós, a rossz extinkciós, a félelemfelidézési és az otthoni sejtcsoportban (X2(3) = 15,05, p = 0,002), így a félelemfelidéző ​​csoport viszonylag jó extinkciót mutatott.regressziós (átlagos rangkülönbség = 11,54, p = 0,003), gyenge regressziós (átlagos rangkülönbség = 10,57, p = 0,034) és otthoni sejtben (átlagos rangkülönbség = 12,79, p = 0,005) csoportok (4C. ábra).Továbbá nem volt szignifikáns különbség a jó extinkció, a gyenge extinkció, a félelem felidézése és az otthoni sejtcsoportok között az mPVT-ben mért Fos-expresszió (X2(3) = 2,272, p = 0,518) (4E. ábra) és a Fos-expresszió között az mPVT-ben..Szignifikáns korreláció az extinkciós visszahívással (rs = 0,168 p = 0,468) (4F ábra).Bár szignifikáns különbség volt a jó, a rossz, a félelem felidézése és az otthoni sejtcsoportok között a Fos expressziójában IL afferens mPVT sejtekben (X2(3) = 9,252, p = 0,026), a post hoc összehasonlítás nem mutatott ki egyet vagy kettőt.Jelentős különbségek a csoportok között (4G. ábra).Továbbá nem volt szignifikáns korreláció az IL-afferens mPVT sejtekben a Fos expressziója és az extinkciós visszahívás között (rs = 0,174, p = 0,450) (4H ábra). Ezután szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, rossz extinkciós, félelem-visszaemlékezési és otthoni ketreces csoportok között a Fos expressziójában a pPVT-ben (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), így a jó extinkciós csoport (átlagos rang) Diff. = 14,96, p = 0,010), de nem a rossz kihalás (átlagos rangkülönbség = 12,86, p = 0,113) vagy a félelem felidézése (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999) nem mutatott több Fos kifejezést, mint a otthoni ketreces csoport (4I. ábra). Ezután szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, rossz extinkciós, félelem-visszaemlékezési és otthoni ketreces csoportok között a Fos expressziójában a pPVT-ben (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), így a jó extinkciós csoport (átlagos rang) Diff. = 14,96, p = 0,010), de nem a rossz kihalás (átlagos rangkülönbség = 12,86, p = 0,113) vagy a félelem felidézése (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999) nem mutatott több Fos kifejezést, mint a otthoni ketreces csoport (4I. ábra). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) или группы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Továbbá szignifikáns különbség volt a jó extinkció, a gyenge extinkció, a félelem felidézése és az otthoni sejtcsoportok között a Fos expressziójában pPVT-ben (X2(3)=13,89, p=0,003), így a jó extinkciós csoport (átlagos rang Diff. = 14,96, p = 0,010), de nem a gyenge extinkciós csoportban (átlagos rangkülönbség = 12,86, p = 0,113) vagy a félelemmemória csoportban (átlagos rangkülönbség = 2,571, p > 0,999) nem mutatott kifejezettebb Fos kifejezést, mint az otthoni sejtcsoport (4I. ábra).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 家笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 （3） = 13,89 p = 0,003） 使得 （（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Átlagos rangkülönbség = 12,86, p = 0,113) 或恐惧弞忆缌(Átlagos rangkülönbség) ).= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Átlagos rangkülönbség = 12,86, p = 0,113)）.Másodszor, szignifikáns különbségek voltak a Fos expressziójában a pPVT-ben a jó, rossz, a félelem felidézése és az otthoni sejtcsoport között (X2(3) = 13,89, p = 0,003), így a jó beviteli csoport lett (átlagos rangkülönbség = 14,96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), de nem rosszabb a kihalás (átlagos rangkülönbség = 12,86, p = 0,113) vagy a félelem-felidéző ​​csoport (átlagos rangkülönbség = 2,571, p > 0,999), mint az otthoni sejtcsoport (4I. ábra)..Azonban nem volt szignifikáns korreláció a pPVT Fos expressziója és az extinkciós visszahívás között (rs = 0,051, p = 0,825) (4J ábra).Végül szignifikáns különbség volt a Fos expressziójában a pPVT IL-afferensekben a jó extinkciós, gyenge extinkciós, félelmemlékkel rendelkező csoportok és az otthoni sejtekben (X2(3) = 12,34 p = 0,006), tehát a jó Fos expresszió IL-ben rosszabb, mint az extinkciós csoportokban (átlagos rangkülönbség = 12,54, p = 0,014) és az otthoni sejtben (átlagos rangkülönbség = 12,89, p = 0,049) (4K. ábra), és szignifikánsan korrelált az IL-afferensekkel a pPVT-n belül. az extinkció visszavonása, a jobb extinkciós felidézés ezen IL-afferensek nagyobb aktivációjával járt együtt (rs = -0,438, p = 0,047) (4L. ábra).
A fos aktivitás megnövekedett a hátsó paraventricularis thalamus (PVT) IL-afferenseiben patkányokban, ami jó regressziót mutatott.(A) Nem volt szignifikáns különbség a csoportok között a Fos expressziójában aPVT-ben.(B) Az aPVT-ben nem volt szignifikáns összefüggés a Fos expressziója és az extinkció visszahívása között.(C) A félelem-felidéző ​​csoport fokozott Fos-expressziót mutatott az IL-afferensekben az összes többi csoporthoz képest.(D) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója között az IL-afferensekben és az extinkciós visszahívás között az aPVT-ben.(E) Nem volt szignifikáns csoportközi különbség a Fos expressziójában mPVT-ben.(F) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója és az extinkciós memória között mPVT-ben.(G) A fos expressziója afferens IL-sejtekben mPVT-ben nem különbözött szignifikánsan a csoportok között.(H) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója között az IL afferensekben és az extinkciós visszahívás között az mPVT-ben.(I) Egy jól kihalt csoport, de egyetlen másik csoport sem mutatott fokozott Fos aktivitást pPVT-ben az otthoni ketreces csoporthoz képest.(J) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója és az extinkció visszahívása között pPVT-ben.(K) A jó extinkciós csoport fokozott Fos expressziót mutatott IL afferens sejtekben a gyenge extinkciós csoporthoz és az otthoni sejtcsoporthoz képest.LA hibasávok az átlag szórását jelentik. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Ezután a patkányok aCLA-jában és mCLA-jában mért globális és IL-projekció-specifikus Fos-aktivitást minden csoportban elemeztük. Szignifikáns különbség volt a jó kihalás, a rossz extinkció, a félelem felidézése és az otthoni ketrec csoportjai között a Fos expressziójában az aCLA-ban (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), így a félelem felidézése csoport (átlagos rangkülönbség = =) 14,50, p = 0,049), de sem a rossz (átlagos rangkülönbség = 10,21, p = 0,373), sem a jó extinkciós csoportok (átlagos rangkülönbség = 4,607, p > 0,999) nem mutattak több Fos kifejezést, mint az otthoni ketreces csoport ( 5A. ábra). Szignifikáns különbség volt a jó kihalás, a rossz extinkció, a félelem felidézése és az otthoni ketrec csoportjai között a Fos expressziójában az aCLA-ban (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), így a félelem felidézése csoport (átlagos rangkülönbség = =) 14,50, p = 0,049), de sem a rossz (átlagos rangkülönbség = 10,21, p = 0,373), sem a jó extinkciós csoportok (átlagos rangkülönbség = 4,607, p > 0,999) nem mutattak több Fos kifejezést, mint az otthoni ketreces csoport ( 5A. ábra). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое различие = 14,50, p = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4,607, p > 0,999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис . 5А). Szignifikáns különbség volt az aCLA Fos expressziójában a jó extinkciós, gyenge extinkciós, félelemfelidéző ​​és az otthoni sejtcsoportok között (X2(3) = 8,455, p = 0,036), így a félelemfelidézés csoportja (átlagos rangkülönbség = 14,50, p = 0,049), de sem a gyenge (átlagos rangkülönbség = 10,21, p = 0,373), sem a jó extinkciós csoport (átlagos rangkülönbség = 4,607, p > 0,999) nem mutatott több Fos-expressziót, mint az otthoni sejtcsoport (.5A ábra) . Acla 中 fos 表达 的 良好 消退 、 消退差 、 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 (átlagos rangsor = 14,50 ¢ p = p = p = p = p = p = p = p = p = 0.049），但无论是差（平均秩差= 10.21，p = 0.373）还是良好灭绝（平均秩差= 4.607，p > 0.999）组，都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) . Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (átlagos átlag (átlagos átlag Rank Diff. = 14,50 ， P = P = P = P = P = 14. 0,049） ， 无论是 差 平均 秩差 秩差 秩差 = 10,21 ¢ p = 0,373） 良好 （平均 秩差 秩差 = 4,607 ¢ p> p> p> p> p> p> p> p> p> p> p> p> p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50) , p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). Szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, gyenge extinkciós, félelemfelidézési és otthoni sejtcsoportok között az aCLA Fos expressziójában (X2(3) = 8,455, p = 0,036), tehát a félelem felidézése csoport (átlagos rangkülönbség = 14,50), p = 0,049 ), de a gyenge (átlagos rangkülönbség = 10,21, p = 0,373) és jó extinkciójú (átlagos rangkülönbség = 4,607, p > 0,999) csoportok magasabb Fos expressziót mutattak, mint az otthoni sejtcsoport (5A. ábra). .Nem volt szignifikáns korreláció a globális Fos-expresszió (rs = 0,036, p = 0,876) (5B. ábra) vagy a Fos expressziója az IL aCLA afferens sejtekben (rs = -0,282, p = 0,215) és az extinkciós felidézés (5B. ábra)..5D), szintén nem volt szignifikáns különbség a jó extinkció, a rossz extinkció, a félelem felidézése és az otthoni sejtcsoportok között a Fos expressziójában az aCLA IL afferensekben (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (5C. ábra)..). Ezután szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, rossz extinkciós, félelem-felidézési és otthoni ketreces csoportok között a Fos expressziójában az mCLA-ban (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), így a jó extinkciós csoport (átlagos rangkülönbség) . = 12,93, p = 0,038), de sem a gyenge extinkciós csoportok (átlagos rangkülönbség = 5,143, p > 0,999), sem a félelem-visszaemlékezési csoportok (átlagos rangkülönbség = 14,00, p = 0,063) nem mutattak szignifikánsan több Fos-expressziót az mCLA-ban az otthoni ketreces csoporthoz képest (5E. ábra). Ezután szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, rossz extinkciós, félelem-felidézési és otthoni ketreces csoportok között a Fos expressziójában az mCLA-ban (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), így a jó extinkciós csoport (átlagos rangkülönbség) . = 12,93, p = 0,038), de sem a gyenge extinkciós csoportok (átlagos rangkülönbség = 5,143, p > 0,999), sem a félelem-visszaemlékezési csoportok (átlagos rangkülönbség = 14,00, p = 0,063) nem mutattak szignifikánsan több Fos-expressziót az mCLA-ban az otthoni ketreces csoporthoz képest (5E. ábra). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями о страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (средняя разница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos в mCLA. Ekkor szignifikáns különbség volt a jó extinkció, a rossz extinkció, a félelem emlékei és az otthoni sejtcsoportok között az mCLA Fos expressziójában (X2(3) = 10,12, p = 0,018), így a jó extinkciós csoport (átlagos különbségi rang = 12,93, p) = 0,038), de sem a gyenge extinkciós csoportok (átlagos rangkülönbség = 5,143, p > 0,999), sem a félelem-visszaemlékezési csoportok (átlagos rangkülönbség = 14,00, p = 0,063) nem mutattak szignifikánsan nagyobb Fos expressziót az mCLA-ban.az otthoni ketreces csoporthoz képest (5E. ábra).接下来 ， 在 McLa 中 的 fos ， ， 良好 消退组 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 （（x2 （3） = 10,12 kezetes p = 0,018） ， 良好 （（（（（（（（（（， ° C -os p = 0,018） （(（ Átlagos rangkülönbség .= 12.93, p = 0.038)，但在mCLA 中，弱消退（平均秩差= 5.143，p > 0.999）和恐惧回忆组（平均秩差= 14.00，p = 0.063）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组（图5E）. = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 McLA 中 ， 弱消退 平均 秩差 秩差 秩差 秩差 = 5,143 kezetes p> 0,999） 和 （平均 秩差 秩差 = 14,00 ¢ p = 0,063） 未 显示 更 多 多 的 的 （平均 平均 秩差 秩差 ， ° C = 0,063））） 未 未 未 未）））） ， ° C = 0,063） P = 0,063, fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）. Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, группой с плохим угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хорошего угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клеткой (Рисунок 5E). Továbbá szignifikáns különbség volt a Fos expressziójában az mCLA-ban a jó extinkciós csoport, a rossz extinkciós csoport, a félelem-visszacsatolási csoport és az otthoni sejtcsoport között (X2(3) = 10,12, p = 0,018), így a jó extinkció (átlagos rangkülönbség = 12,93, p = 0,038), de az mCLA-ban sem a gyenge extinkció (átlagos rangkülönbség = 5,143, p > 0,999), sem a félelem-visszahívási csoport (átlagos rangkülönbség = 14,00, p = 0,999) = 0,063 nem mutatott jobbat Multi Fos expresszió az otthoni sejtcsoporthoz képest (5E. ábra).Azonban a globális Fos expresszió mCLA-ban (rs = 0,321, p = 0,156) (5F. ábra) vagy afferens IL mCLA sejtekben (rs = -0,121, p = 0,602) és az extinkciós visszahívás (5H. ábra) között nincs szignifikáns különbség jó extinkciós, gyenge extinkciós, félelemfelidézéssel és otthoni sejttel rendelkező csoportok a Fos expressziójához IL mCLA afferens sejtekben (X2(3)=4,923, p=0,178) (5G. ábra).
Jó extinkciós memóriával rendelkező patkányokban a fos-aktivitás megemelkedett a claustrum közepén.(A) A félelem-felidéző ​​csoport, de a többi csoport nem, fokozott Fos aktivitást mutatott az otthoni sejtcsoporthoz képest az aCLA-ban.(B) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója között az aCLA-ban és az extinkciós visszahívás között.(C) A fos expressziója IL afferens aCLA sejtekben nem különbözött szignifikánsan a csoportok között.(D) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója között az IL-afferensekben és az extinkciós visszahívás között az aCLA-ban.(E) A jól kihalt csoport, de a többi csoport nem, fokozott Fos aktivitást mutatott az mCLA-ban az otthoni sejtcsoporthoz képest.(F) Az mCLA-ban nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója és az extinkció visszahívása között.(G) A fos expressziója IL mCLA afferens sejtekben nem különbözött szignifikánsan a csoportok között.(H) Nem volt szignifikáns korreláció az IL-afferensek Fos-expressziója és az mCLA-ban az extinkció visszahívása között.A hibasávok az átlag szórását jelentik. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05.
Ezután a globális és az IL-projekció-specifikus Fos aktivitást mBLA-ban és pBLA-ban elemeztük minden patkánycsoportban.Nem volt szignifikáns különbség a jó extinkció, a rossz extinkció, a félelem felidézése és az otthoni sejtcsoportok között a Fos expressziójában mBLA-ban (X2(3)=0,944, p=0,815) (6A. ábra).Szintén nem volt szignifikáns különbség a jó regressziót, a gyenge regressziót, a félelemfelidézést és az otthoni sejt Fos expresszióját mutató csoportok között az IL mBLA afferens sejtekben (X2(3)=0,518, p=0,915) (6C. ábra).Ezenkívül nem volt szignifikáns korreláció a globális Fos expresszió mBLA-ban (rs = 0,126, p = 0,588) (6B. ábra) és a Fos expressziója az IL mBLA afferens sejtekben (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).6D ábra) és a kihalás visszahívása.Szintén nem volt szignifikáns különbség a jó extinkció, a gyenge extinkció, a félelem memória és az otthoni sejtcsoportok között a Fos expressziójában pBLA-ban (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (6E. ábra), és szintén nem volt szignifikáns különbség a pBLA-ban Jó.kihalás, gyenge extinkció, félelem felidézése és otthoni sejtcsoportok Fos expressziójában IL afferens sejtekben (X2(3)=1,954, p=0,582) (6G. ábra).Végül a globális Fos-expresszió pBLA-ban (rs = 0,070, p = 0,762) (6F. ábra) és a Fos-expresszió a pBLA IL-afferens sejtekben (rs = 0,122, p = 0,597) és az extinkció visszahívása (6H. ábra).
Az extinkciós szaporodásban mutatkozó egyéni különbségeket nem térképezték fel a bazolaterális amygdala Fos expressziójának különbségeivel.(A) Nem volt szignifikáns csoportközi különbség a Fos expressziójában mBLA-ban.(B) Az mBLA-ban nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója és az extinkció visszahívása között.(C) A fos expressziója IL mBLA afferens sejtekben nem különbözött szignifikánsan a csoportok között.(D) Nem volt szignifikáns korreláció az IL afferens sejtekben a Fos expressziója és az mBLA extinkciós felidézése között.(E) Nem volt szignifikáns csoportközi különbség a Fos expressziójában pBLA-ban.(F) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója és az extinkció visszahívása között pBLA-ban.(G) A fos expressziója afferens IL pBLA sejtekben nem különbözött szignifikánsan a csoportok között.(H) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója között IL afferens sejtekben és a kihalási visszahívás között a pBLA-ban.A hibasávok az átlag szórását jelentik.
Végül a globális és az IL-projekció-specifikus Fos-aktivitást mvHPC-ben és pvHPC-ben elemeztük minden patkányban. Szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, gyenge extinkciós, félelemfelidézési és otthoni ketreces csoportok között a Fos expressziójában az mvHPC-ben (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), így a jó extinkció (átlagos rangkülönbség = 13,29) , p = 0,031), de sem a gyenge extinkció (átlagos rangkülönbség = 6,857, p > 0,999), sem a félelem felidézése (Mean Rank Diff. = 8,000, p = 0,864) nem mutatott több Fos-expressziót, mint az otthoni ketrecben élő csoport (ábra). 7A). Szignifikáns különbség volt a jó extinkciós, gyenge extinkciós, félelemfelidézési és otthoni ketreces csoportok között a Fos expressziójában az mvHPC-ben (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), így a jó extinkció (átlagos rangkülönbség = 13,29) , p = 0,031), de sem a gyenge extinkció (átlagos rangkülönbség = 6,857, p > 0,999), sem a félelem felidézése (Mean Rank Diff. = 8,000, p = 0,864) nem mutatott több Fos-expressziót, mint az otthoni ketrecben élő csoport (ábra). 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группе с отзывом страха (средняя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). Szignifikáns különbség volt az mvHPC Fos expressziójában a jó extinkciós, gyenge extinkciós, félelemfelidéző ​​és otthoni sejtek között (X2(3) = 8,056, p = 0,045), tehát jó extinkció (átlagos rangkülönbség = 13,29), p = 0,031), de sem a gyenge extinkciós csoportban (átlagos rangkülönbség = 6,857, p > 0,999), sem a félelem-felidéző ​​csoportban (átlagos rangkülönbség = 8,000, p = 0,864) nem volt magasabb a Fos expressziója, mint az otthoni csoportban.cella (7A. ábra). mvhpc 中 fos 表达 的 良好 消退 、 不良 消退 、 恐惧 回忆 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8,056, p = 0,045） ， 因此 消退 （平均 秩差 = 13,29））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））） 平均 平均 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 平均 平均 平均 平均 平均 平均 （（（（（消退 消退 消退 消退 良好 良好 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 因此 f ），但无论是弱消退（平均秩差= 6.857，p > 0.999）还是恐惧回忆（平均秩差= 8.000，p = 0.864）组都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图2）。 mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 之间 存在 显着 显着 （（（x2 (3) = 8,056, p = 0,045） ， 良好 （平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031 kett ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6,857 kezeti p. " Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» и «домашняя клетка» для экспрессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов = 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воспоминания о страхе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Szignifikáns különbség volt a jó, a rossz, a félelem felidézése és az otthoni sejtcsoport között az mvHPC-ben mért Fos-expresszió tekintetében (X2(3) = 8,056, p = 0,045), és ezért jó regresszió (átlagos rangkülönbség = 13,29), p = 0,031), de a gyenge extinkciós csoportok (átlagos rangkülönbség = 6,857, p > 0,999) és a félelemmemóriákkal (átlagos rangkülönbség = 8,000, p = 0,864) magasabb Fos expressziót mutattak, mint az otthoni ketrecben lévő csoportok (2. ábra).7A).Szignifikáns különbség azonban nem volt (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (7C. ábra).Ezenkívül nem volt szignifikáns korreláció a globális Fos expresszió mvHPC-ben (rs = -0,233, p = 0,309) (7B. ábra) és a Fos expressziója az mvHPC afferens IL-sejtekben (rs = 0,056, p = 0,810) (7D. ábra).és egy jelentést az eltűnésről.Továbbá nem volt szignifikáns különbség a jó extinkció, a rossz extinkció, a félelem felidézése és az otthoni sejtcsoportok között a Fos expressziójában pvHPC-ben (X2(3) = 3,623, p = 0,353) (7E ábra), és nem volt szignifikáns különbség.különbség a Fos expresszió jó regressziójában pvHPC afferens IL-sejtekben, gyenge regresszió, félelem-memória és otthoni sejtcsoportok (X2(3)=3,871, p=0,276) (7G. ábra).Végül nem volt szignifikáns korreláció a pvHPC globális Fos expressziója (rs = -0,127, p = 0,584) (7F ábra) és a Fos expressziója között IL-afferens pvHPC sejtekben (rs = 0,176, p = 0,447) és az extinkciós visszahívás között (7F ábra) ).7H).
A patkányok ventrális hippokampuszában megemelkedett a fos expressziója, ami jó memória kihalására utal.(A) A jól kihalt csoport, de a többi csoport nem, fokozott Fos-expressziót mutatott mvHPC-ben az otthoni sejtcsoporthoz képest.(B) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója és az extinkció visszahívása között mvPHC-ben.(C) A fos expressziója mvHPC afferens IL sejtekben nem különbözött szignifikánsan a csoportok között.(D) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója között az IL-afferensekben és az extinkciós visszahívás között az mvHPC-ben.(E) Nem volt szignifikáns különbség a csoportok között a Fos expressziójában pvHPC-ben.(F) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója és az extinkció visszahívása között pvHPC-ben.(G) A fos expressziója a pVHPC afferens IL sejtekben nem különbözött szignifikánsan a csoportok között.(H) Nem volt szignifikáns korreláció a Fos expressziója között az IL-afferensekben és a kihalási visszahívás között a pvHPC-ben.A hibasávok az átlag szórását jelentik. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05.Az összes régióra vonatkozó elsődleges elemzésünk három szinten mutatott összehasonlítást az anteroposterior tengely mentén, bár minden olyan régiót is elemeztünk, amelyek az anteroposterior tengely mentén összeestek.Ezen elemzések eredményeit az 1. táblázat tartalmazza.
Itt teszteltük, hogy az extinkciós felidézés egyéni különbségei tükröződnek-e az alsó limbikus kéreg afferens aktivitásának különböző mintáiban.Ebből a célból felmértük a Fos aktivitását a paraventricularis thalamusból, a claustrumból, a bazolaterális mandulából és a ventrális hippocampusból származó IL-projekciókban extinkciós visszajátszás után.IL-vetítő sejtekben nagyobb aktivitást találtunk a PVT hátsó régiójában azokban a patkányokban, amelyek jó extinkciós felidézést mutattak, mint a gyenge extinkciós patkányoknál.Nem volt különbség a nucleus clavicularis, a ventralis hippocampus vagy a bazolaterális mandula IL-afferenseiben.Az IL-vetítő sejtek mellett a patkány claustrum és a ventralis hippocampus kiválasztott területein fokozott idegi aktivitást figyeltek meg jó felbontással.Eredményeink azt mutatják, hogy a sikeres extinkciós memóriát specifikus PVT-projekciók szervezik az IL-re és a nem IL-t célzó sejtekre a claustrumban és a ventrális hippocampusban.
Azt találtuk, hogy a PVT IL előrejelzése aktív volt azoknál a patkányoknál, amelyek jó kihalási felidézést mutattak, ami összhangban van egy nemrégiben végzett vizsgálattal, amely azt mutatja, hogy a PVT szükséges a kihalás felidézéséhez.Ez a tanulmány nem alkalmazott szubrégió-specifikus manipulációkat, de kimutatta, hogy mind a laterális központi amygdalán lévő PVT-projekciókra, mind a PVT-n lévő IL-projekciókra szükség volt a kihalás reprodukálásához.Eredményeink azt mutatják, hogy az IL-PVT-CeL lánc mellett a PVT utáni IL-be való belépésre is szükség lehet a kioltás visszahívásához.Így kiderül, hogy mind az efferens, mind az afferens IL-kapcsolatok részt vesznek a kihalás újratermelésében.A következő fontos lépés annak meghatározása, hogy mi okozza a pPVT-t az extinkciós reprodukció jelének az idegi áramkör szintjén.Az IL-vel való kapcsolat mellett a korábbi duct-tracking tanulmányok31,32 kimutatták, hogy a pPVT bemenetet kap a ventralis periaqueductal grey-től (vPAG), ami az extinkciós tanuláshoz kapcsolódik33,34,35,36.Bár a vPAG szerepe a kihalás felidézésében még nem tisztázott, a pPVT vPAG általi előrejelzése vonzó jelölt a sűrűségük és mindkét régió részvétele a félelem kihalásának korábbi bizonyítékainak generálásában.
PVT eredményeink másik fontos szempontja, hogy az elülső-hátulsó tengelyük mentén specializálódtak.Meglepő módon a PVT-projekció neuronális aktivitása IL-ben az ellenkező viselkedési állapottal korrelál, így az IL-ben a PVT-projekció előtti aktivitás a félelem felidézésével függ össze, míg a pPVT-projekció sikeres visszahívási kioltás (azaz félelem) után aktív.Ez a funkcionális heterogenitás a PVT-n belül nem meglepő a korábbi munkák alapján [a 37-ben tárgyalt].A PVT funkcionális eloszlásának szembetűnő példája a közelmúltban jelent meg egy tanulmányban, amely a PVT specifikus sejttípusainak tulajdonságait jellemezte.Ez a tanulmány azt mutatja, hogy a DRD2-t expresszáló dopaminsejtek túlnyomórészt a pPVT-ben expresszálódnak, beidegzik a mellső végtag kéregét, és reagálnak averzív ingerekre.A második sejtpopuláció túlnyomórészt az aPVT-ben expresszálódik, és az alacsony fiziológiás izgalom állapotába való átmenetet jelzi, és beidegzi az alsó végtagok kérgét.Eredményeink aligha illeszkednek ebbe a mintába, mivel az IL-t projekciózó aPVT sejtek a félelem felidézése során aktívak, míg a pPVT projekciók aktívak és az állatok alacsony félelmet mutatnak.A látszólagos eltérésnek legalább két lehetséges magyarázata van.Először is, az azonosított sejttípusok nem kizárólag a TVV egy elülső-hátulsó helyén helyezkednek el.Így a jó extinkciós memóriával rendelkező patkányokban lévő aktív IL-vetítő pPVT-sejtek a sejtek azon osztályába tartozhatnak, amelyek nagyobb valószínűséggel mutathatók ki az aPVT-ben, és alacsony arousal állapotba való átmenetet jeleznek.Ugyanez igaz lehet a félelememlékezet után aktivált aPVT-ben az IL-vetítő sejtekre.Másodszor, a korábbi nyomkövetési vizsgálatok IL3-projekciót okozó pPVT-k jelenlétét azonosították, bár úgy tűnik, hogy egyes sejttípusok DRD2-tartalmú sejtekből származnak, más sejttípusok kivetülhetnek az IL-be, és aktiválódhatnak a kioltás sikeres reprodukciója után.
Bár a tanulmány célja az volt, hogy azonosítsa a különbségeket a különböző extinkciós fenotípusokat mutató patkányok között, ezek a kísérletek a félelem-memória mechanizmusokkal kapcsolatos új adatokat is feltártak.Érdekes módon megnövekedett Fos-aktivitást tapasztaltunk az elülső CLA-ban félelemmemóriával rendelkező patkányokban.
A kulcscsont a kérgi kommunikáció központjaként helyezkedik el, és az érzékszervi integrációtól a figyelemig és az alvásig terjedő folyamatokban vesz részt40,41,42,43.Korlátozott bizonyítékok állnak rendelkezésre arra vonatkozóan, hogy a clausrum hogyan vesz részt a félelem kondicionálásában vagy a félelem kifejezésében, azonban korábbi kutatások kimutatták, hogy a kontextuális félelemkifejezés szerepet játszik a fos aktivitásában a clausrumban.A közelmúltban arról számoltak be, hogy az entorhinalis kéregbe történő atresia-projekciók gátlása a kontextuális félelemkondicionálás során rontja a hosszú távú memória kialakulását, bár a félelemkifejezés iránti igényüket nem vizsgálták.Ugyanebben a vizsgálatban fokozott Fos aktivációt figyeltek meg, amikor az állatokat új környezetnek tették ki, összehasonlítva az ismerős környezetnek kitett egerekkel.Ezt szem előtt tartva, az itt közölt CLA aktiválás oka inkább az új kamera tesztelés közbeni expozíciója, nem pedig magától a visszahívástól való félelem.A zárak félelemben és helyzetfeldolgozásban betöltött szerepének pontosabb jellemzésére a jövőbeni tanulmányoknak célzott zármanipulációt kell alkalmazniuk.
Bár a korábbi munkák kimutatták, hogy a PVT összefüggésben áll a félelem memória kifejezésével, 45, 46, 47 nem figyeltünk meg semmilyen változást a teljes Fos expresszióban patkányokban, amikor 48 órával a kondicionálás után felidézték a félelmet.Ez a különbség több tényezővel magyarázható, beleértve a korábbi teszteket a diszkrét jelzésektől való félelmet, ugyanabban a kontextusban, amelyben a kondicionálás történt, míg a mi kísérletünkben a tesztelést egy új helyiségben végeztük.Emellett a tesztelés után 60 perccel elaltattuk állatainkat, míg az előző munka 90 perces időpontot használt.Végül a korábbi vizsgálatok során a tesztet olyan helyiségben végezték, ahol az állatok étvággyal tudtak reagálni, míg munkánk során patkányokat teszteltünk étvágytalanság nélkül.Noha ez bizonyos fokú kondicionált gátlást tesz lehetővé, bizonyíték van arra, hogy ha az állatokat megengedjük, hogy gátolja a nyomást, hogy táplálékot szerezzenek, miközben megvizsgálják, hogy félnek-e a jelzésektől, az motivációs konfliktust idéz elő (azaz félelem versus jutalom), ami kulcsfontosságú stimuláló tényező.részvétel PVT48, 49. .
A bazolaterális amygdala köztudottan részt vesz a félelem kihalásának megszerzésében50,51, és bizonyíték van arra, hogy a BLA-projekciók az IL-re is részt vesznek ebben a folyamatban23.Nem világos azonban, hogy a BLA és kapcsolatai részt vesznek-e az extinkciós visszatérésben.A képalkotó vizsgálatok23,28 fokozott BLA-aktivitást mutattak ki az elhalványult emlékeket felidéző ​​állatokban.Míg korábbi munkáink nem mutattak ki különbséget a BLA aktiválásában a jó és a rossz kihalási patkányok között, az itt elért eredményeink arra utalnak, hogy a kihalás felidézése általában nem befolyásolja a BLA-t vagy az aktiválást a BLA IL előrejelzésében.Eredményeinkkel összhangban, bár az áramkör-manipulációs tanulmányok azt sugallják, hogy az IL-bemenetek a BLA-ba fontosak az extinkciós tanuláshoz, nem szükségesek a kihalás felidézéséhez.A BLA szerepét azonban nem lehet teljesen figyelmen kívül hagyni, mivel a legújabb bizonyítékok arra utalnak, hogy a BLA bizonyos sejttípusaira szükség van a kihalás reprodukálásához.
Nevezetesen, a félelem felidézése nem eredményezett Fos aktivációt a BLA-ban, mivel a korábbi léziók, gyógyszeres és képalkotó vizsgálatok ezt a területet érintették a félelem kifejezésében és/vagy a félelem visszaállításában54,55,56,57.Az itt bemutatott adatok egyesítik az amygdala bazális és laterális almagját, és a korábbi adatok arra utalnak, hogy a félelem kifejezése a fos aktivitást hajtja a laterális mag dorzális oldalán.Külön elemeztük a mögöttes és a laterális adatokat, de egyik esetben sem volt különbség (az adatok nem láthatók), és mindkét terület összeomlott az itt bemutatott adatokban.Nem elemeztük a laterális amygdala alrégióit, így ezen a területen specifikus változásokat elfedhettünk.Egy másik lehetőség, hogy a BLA-ban a Fos-aktivitás nem változik, a félelem emlékeinek időzítése a kondicionáláshoz képest.Néhány korábbi munka kimutatta, hogy a BLA hozzájárulása a félelemkifejezéshez a kondicionálás utáni idő előrehaladtával csökken, így az expresszió BLA-függő a kondicionálás után 24 órával, de független 7 nappal (45. hivatkozás, de lásd 58.).48 órával az edzés után következett be, így a Fos aktivitás változásának hiánya ebben az időpontban valószínűleg a félelemkifejezésben való BLA részvételének időfüggő változásait tükrözi.
Végül bizonyítékot találunk arra, hogy a sikeres kihalási memória a ventrális hippocampushoz kapcsolódik.Ez jellemző a „köztes” vHPC-kre, mivel ugyanez a minta nem volt látható a hátsó régióban.A korábbi munkákkal összhangban nem találtunk változást a Fos aktiválásában az afferens vHPC IL-ekben.Lényeges bizonyíték van arra, hogy a vHPC28, 60, 61 szükséges a félelem aktualizálásához, amikor a CS azon a kontextuson kívül történik, amelyben a fading fellép, és ez legalább részben a vHPC IL13-ba való belépésétől függ.Ezen korábbi eredmények alapján azt várnánk, hogy a gyenge fading a vHPC megnövekedett előre jelzett IL-aktivitásával jár.Ez azonban nem így volt, mivel nem volt különbség a Fos-aktivitásban az IL-vel kivetített retrográd-jelölt vHPC-kben vagy a jelöletlen sejtekben a vHPC-kben.Ez arra utal, hogy az elhalványulás kontextusában való elhalványulásra való emlékezés képtelensége más mechanizmust válthat ki, mint a megújulástól való félelem.
Fontos megjegyezni néhány eredendő tervezési és elemzési korlátot, és azt, hogy ezek hogyan befolyásolják következtetéseinket.Először az állatokat felső és alsó harmadokra, az egereket pedig „jó” és „rossz” csoportokra osztottuk a kihalási visszahívási pontszámok alapján.Erre azért van szükség, hogy elkerüljük azokat a csoportsémákat, amelyek az állatokat az eloszlás közepétől külön csoportokra osztják, vagy azokat a csoportsémákat, amelyek kizárják az állatokat az eloszlás közepéből, például a medián szerinti elkülönítést vagy a patkányok felső és alsó harmadának összehasonlítását. .el akarjuk kerülni ezt a helyzetet, mert a medián felosztás nem tükrözi a traumára adott emberi válaszok változatosságát, amelyet modellezni próbálunk.Ezen túlmenően, bár a patkányok felső és alsó harmadának összehasonlítása lehetővé teszi a hasonló méretű csoportok összehasonlítását, ez a megközelítés figyelmen kívül hagyja az eloszlás középpontjában lévő állatokat, és nem tükrözi pontosan a sérülésekre adott reakciók változatosságát.Módszerünk ugyan problémáktól szenvedhet a heterogén variancia és az egyenlőtlen mintaméretű csoportok összehasonlítása miatt, de jobban megragadja azt, amit próbálunk utánozni, mint az alternatív módszerek.
Az itt bemutatott eredmények segítenek jobban megérteni, hogy a kihalási felidézés egyéni különbségei hogyan tükröződnek az idegi áramkörök aktivitásának különbségeiben.Eredményeink vonatkozhatnak a poszttraumás stressz-zavarra, amelyről ismert, hogy túlzott félelemmel és a félelemreakciók kiküszöbölésére való képtelenséggel jár.Megmutatjuk, hogy az extinkciós felidézésben mutatkozó különbségek az IL-re vetített belső és külső neurális aktivitás különbségeihez kapcsolódnak.Ezek a különbségek az anteroposterior tengely mentén elkülönülő régiókban oszlottak meg, tovább hangsúlyozva az agyműködés szubregionális szintű értékelésének fontosságát.A jelenlegi módszer hátrányai közé tartozik a vizsgálat relevanciája és a hím rágcsálókra való összpontosítás.A jövőbeli kutatásoknak meg kell határozniuk a nőstény rágcsálóknál a kihalás tanulásának hátterében álló neurobiológiai mechanizmusokat, és módszereket kell alkalmazniuk az ok-okozati összefüggések levonására.
A jelen tanulmányban használt és/vagy elemzett adatkészletek ésszerű kérésre hozzáférhetők a megfelelő szerzőktől.
Pavlov IP Conditioning: az agykéreg élettani aktivitásának vizsgálata.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO és Davis, M. Tanulási elvek alkalmazása a trauma utáni reakciók kezelésében. Rothbaum, BO és Davis, M. Tanulási elvek alkalmazása a trauma utáni reakciók kezelésében.Rotbaum BO és Davis M. Tanulási elvek alkalmazása a poszttraumás reakciók kezelésében.Rotbaum BO és Davis M. Tanulási elvek alkalmazása a poszttraumás reakciók kezelésében.telepítés.New York College.a tudomány.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Az expozíciós terápia áttekintése: a PTSD kezelésének aranystandardja. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Az expozíciós terápia áttekintése: a PTSD kezelésének aranystandardja.Rauch SA, Eftekhari A. és Ruzek DI Az expozíciós terápia áttekintése: a poszttraumás stressz zavar arany standard kezelése. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾: PTSD 治疗的黄金标准. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Az expozíciós terápia áttekintése: A PTSD-kezelés aranystandardja.Rauch, SA, Eftekhari, A. és Ruzek, DI Az expozíciós terápia áttekintése: a poszttraumás stressz zavar arany standard kezelése.J. Rehabilitáció.tározófejlesztés 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Hosszú expozíciós terápia: múlt, jelen és jövő.A szorongás visszaszorítása 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Mr. Millard et al.A memóriavesztés egzisztenciális és szerzett okai poszttraumás stressz-zavarban: egy ikervizsgálat eredményei.J. Pszichiáter.tároló tartály.42(7), 515-520 (2008).
Mr. Millard et al.Az elhalványuló emlékek felidézésére való képtelenség neurobiológiai alapja poszttraumás stressz zavarban.biológia.Pszichológia.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Egyéni különbségek a félelemben: A félelemreaktivitás és a félelem helyreállításának fenotípusainak elkülönítése. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Egyéni különbségek a félelemben: A félelemreaktivitás és a félelem helyreállításának fenotípusainak elkülönítése.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. és LeDoux, JE. Egyéni különbségek a félelemben: a félelemreaktivitás és a félelem visszaállításának fenotípusainak megkülönböztetése. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Egyéni különbségek a félelemben: a félelemreakció izolálása és a félelem helyreállítása táblázat.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. és LeDoux, JE. Egyéni különbségek a félelemben: a félelemreakciók izolálása és a félelem helyreállításának fenotípusa.J. Trauma.nyomás 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG A patkányok akusztikus megdöbbentő reakciója a félelem kihalásának egyedek közötti változását jelzi előre. Russo, AS & Parsons, RG A patkányok akusztikus megdöbbentő reakciója a félelem kihalásának egyedek közötti változását jelzi előre.Russo, AS és Parsons, RG A patkányok akusztikus megdöbbentő reakciója előrevetíti a félelem kihalásának egyéni különbségeit. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异. Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS és Parsons, RG A patkányok akusztikus megdöbbentő reakciója előrevetíti a félelem kihalásának egyéni különbségeit.Neurobiológia.tanulmány.Memória.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG A félelem kihalásának felidézésének egyéni változékonysága a mitogén által aktivált protein kináz foszforilációjával függ össze az infralimbicus kéregben. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG A félelem kihalásának felidézésének egyéni változékonysága a mitogén által aktivált protein kináz foszforilációjával függ össze az infralimbicus kéregben.Russo, AS, Lee, J. és Parsons, RG A félelemfelidéző ​​extinkció egyéni variabilitása a mitogén által aktivált protein kináz foszforilációjával függ össze az infralimbicus kéregben. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG 回忆恐惧消退的个体差异与边缘下皮质中丝裂. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG A félelem elhalványulására való emlékezés a perifériás 美裯中丝裂原活化筒能激酶的foszforifikációban mutatkozó egyéni különbségekhez kapcsolódik.Russo, AS, Lee, J. és Parsons, RG. A félelem kihalásának egyéni különbségei a felidézés során a mitogén által aktivált protein kinázok foszforilációjával kapcsolatosak az alsó végtag kéregében.Psychopharmacology 236(7), 2039–2048 (2019).